糖碱比为总糖与烟碱的比值,氮碱比为总氮与烟碱的比值,钾氯比为钾和氯的比值。
同样可将16批样品分为3类,进一步验证了HCA和PCA的结果。黄蛭益肾胶囊所含药味众多,本实验指纹图谱归属到的药材仅7味,还有枸杞、薏苡仁、山药等药材成分未在此指纹图谱结果中体现,主要是由于这类药材所包含成分多为水溶性等大极性成分,色谱分离难度较大,针对此类化合物的分析后续拟采用HILIC模式进行分析。
据图5可知,共找到8个成分,分别为:13号峰(黄芪异黄烷苷)、11号峰(人参皂苷Rg1)、7号峰(毛蕊异黄酮葡萄糖苷)、21号峰(7,2'-二羟基-3',4'-二甲氧基异黄烷)、6号峰(松脂醇二葡萄苷)、16号峰(毛蕊异黄酮)、20号峰(芒柄花黄素)、4号峰(绿原酸),表明这8种成分对黄蛭益肾胶囊质量差异影响较大。以PLS-DA模型中的VIP值选出8种差异性成分,可作为控制黄蛭益肾胶囊质量的关键,这几种成分分别来自黄芪、三七、杜仲、益母草、墨旱莲,提示生产企业以后在药品生产中应该着重关注以上成分的变化以及这几味原药材的质量。比较了4种不同流动相系统(甲醇-水、乙腈-水、乙腈-0.05%磷酸水、乙腈-0.1%磷酸水),乙腈-0.05%磷酸水作为流动相所得色谱峰形、响应及分离度均较好。相似度评价结果表明16批黄蛭益肾胶囊相似度在0.925~0.995,总体上质量较为均一。采用DAD检测器对检测波长进行考察,发现在210 nm处的图谱信息较多,峰响应较高。
2.7.3 偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)为了进一步分析造成不同批次样品之间差异的化学成分,在PCA的基础上进行PLS-DA处理。3 讨论本实验分别考察了超声提取方法的不同提取溶剂(50%甲醇、70%甲醇和甲醇)、提取时间(30、45、60 min)和提取料液比(1∶5、1∶10、1∶15)等影响因素,从提取的色谱信息全面性、色谱峰的响应、操作便捷性等方面考虑,确定供试品溶液最佳制备方法为加10倍量甲醇超声提取30 min。杨凡对吴茱萸碱的抗肝癌作用进行研究,发现在抑制肝癌细胞的侵袭、迁移方面,吴茱萸碱能够抑制HEPG2以及瘤组织中-CATENIN蛋白和MRNA水平的表达。
病毒组小鼠的肠道ICAM-1的表达比对照组的高,而实验组小鼠ICAM-1的表达受到了明显的抑制,水野海腾等人认为胡咳痰汤的这些作用可能是其药理作用的黏膜免疫机制。GAO等利用MTT的方法证实,附子中的乌头碱、次乌头碱、新乌头碱等能够抑制肝癌细胞的增长,且认为酯基的存在和数量对于二萜生物碱的细胞毒性有显著的影响。李玉梅等通过观察羌活地黄汤对佐剂性类风湿性关节炎大鼠血清TNF-、IL-1、IL-6的影响,发现羌活地黄汤能使AA大鼠血清TNF-、IL-1、IL-6的水平明显下降,因此说明其可以抑制AA大鼠炎性作用的发展。2.3.3吴茱萸:吴茱萸(拉丁学名:Tetradiumruticarpum),别名吴萸、茶辣,为芸香科植物吴茱萸、石虎或疏毛吴茱萸的干燥近成熟果实。
同时还发现吴茱萸碱能够抑制动物肝癌异位移植瘤的生长。喻鹏久等通过研究白花前胡甲素的抗炎作用,结果发现白花前胡甲素可以抑制NF-kB通路的激活以及抑制巨噬细胞中的NO、IL-1、TNF-炎症因子的释放,从而达到了抗炎的效果。
2.2.2白芍:白芍,又名金芍药,是毛茛科植物芍药(拉丁学名:Paeonialactiflora)的干燥根,主要成分为:单萜及其苷类、三萜及其苷类化合物、黄酮及其化合物、鞣质类以及树脂、糖、蛋白质、金属元素等其他成分。中草药优势还体现在其价格低廉、资源丰富、并且作为天然的免疫药物来源具有一定的安全性,日渐成为抗病毒、抗肿瘤等药物的研发热点。2.1.3羌活:羌活(拉丁学名:NotopterygiumincisumTINGExH.T.CHANG),又名护羌使者、胡王使者,是伞形科羌活属植物,在我国的陕西、四川、甘肃、青海、西藏均有分布。从白头翁中提取得到的皂苷类单体化合物白头翁皂苷D具有显著的抗肿瘤作用。
陈皮营养成分丰富,主要含有挥发油、黄酮类、多糖类、生物碱等多种生理活性物质,具有较高的药用价值。白藜芦醇正是对IL-1、TNF-起到抑制作用,从而能够成功控制促炎物质的数量,使其成功表达抗炎效果。因此对总皂苷进一步探讨及开发利用是有价值的。氯化两面针碱已在临床试用,经初步观察,其对慢性粒细胞型白血病有近期疗效。
2.4其他中草药还有许多中草药被发现对细胞免疫起着一定的作用,比如:木兰科五味子、木犀科连翘、百合科天冬等,但它们具体的作用机制在国内外研究的还比较少。黄玲等的实验结果显示,在环磷酰胺导致免疫功能障碍的小鼠模型中,佛手多糖不仅能够明显提升其腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数,同时也会提高外周血T淋巴细胞比率。
王彦儿等通过研究发现,白头翁皂苷D在体外可诱导肺腺癌细胞A549凋亡。接着通过药效学实验,发现陈皮中特有的多种低极性部分的聚甲氧基黄酮类化合物有一定的抗肿瘤活性,且无毒副作用,是很有前景的抗肿瘤天然药物。
在体外抗肿瘤实验中,异欧前胡素可以明显抑制人中枢神经系统肿瘤细胞株xF498、人卵巢癌细胞SK-Ov-3和人肺癌细胞株A549等肿瘤细胞。据研究表明,两面针中含有多种生物碱,具有抗炎、镇痛作用。2.3.4佛手:佛手(拉丁学名:CitrusmedicaL.vAR.SARCODACTyLISSwINGLE)通常指芸香科植物佛手的干燥果实,是一种珍贵的中药材。水野海腾等通过研究前胡咳痰汤(具有多年临床经验的周超凡教授针对外感风热咳嗽研制出的药汤)药理作用的黏膜免疫机制,结果发现实验组小鼠的肠道IGA含量显著的高于对照组。刘太华等经过研究发现乌头碱和新乌头碱均能抑制巨噬细胞RAW264.7分泌TNF-6,对于CD91和CD13的表达有明显的抑制作用,从而达到抗炎的目的,对于银屑病的治疗具有一定价值。北沙参中的欧前胡素和异欧前胡素具有较高生物学活性,是香豆素类的主要化合物。
PEI-CHuNLIAO等人通过实验发现蛇床子素可以抑制LPS诱导的P38、JNK1/2、PKC-R和PKC-R的磷酸化,不抑制ERK1/2和PKC-/的磷酸化,并且,它也会抑制LPS刺激巨噬细胞NF-kB激活和ROS释放。唐燕等通过研究发现白芍总苷脂质体能上调荷瘤小鼠细胞因子IL-2,IL-12,TNF-的蛋白表达,进而调控淋巴细胞的生长分化、激活巨噬细胞,具有较强的体内抗肿瘤免疫调节作用。
2.1.2蛇床子:蛇床子(拉丁学名:Cnidiummonnieri(L)CuSS),又名野茴香、蛇米,为伞形科植物蛇床的干燥成熟果实,广泛分布于全国大部分地区,是一种较名贵的中草药。除此之外,白头翁还具有抗菌、抗肿瘤、抗病毒、增强免疫等多种药理作用。
低、中浓度的佛手挥发油可以诱导细胞凋亡,但是高浓度的佛手挥发油会引起细胞坏死。这种抗炎作用机制类似于甾体类化合物(如地塞米松)。
岳文华等实验结果表明,白头翁皂苷D在体外具有明显的抗肝癌活性,白头翁皂苷D能够明显降低人体肝癌细胞BEL-7402中BCL-2蛋白的表达,从而使线粒体产生一系列改变,激活CASPASE家族蛋白,启动细胞凋亡程序。附子,是毛茛科植物乌头的子根加工品。但是,中草药的有效成分和作用机理还有待进一步探索、阐明。此外,有研究表明,白芍总苷还可以降低佐剂性关节炎(ADJuvANTARTHRITIS,AA)大鼠腹腔巨噬细胞升高的H2O2和白细胞介素(IL-L)水平,并使AA大鼠的胸腺细胞有丝分裂原反应及脾林巴细胞产生IL-2能力恢复正常,由此说明TGP对AA大鼠有抗炎和机能依赖性的免疫调节作用。
2.2.3乌头:毛茛科乌头(拉丁学名:AconitumcarmichaeliDEBx.)属植物中含有丰富的生物碱成分,具有很高的药用价值。现代科学研究表明,蛇床子具有能够提高机体的免疫力、延缓衰老的作用。
黄治勋等从两面针中分离出7种生物碱,其分别为氯化两面针碱、氧化两面针碱和二氢两面针碱等,经动物试验结果表明:氯化两面针碱可以延长患艾氏腹水癌小鼠的生命,而其他类型的生物碱则效果并不十分明显。袁东升等人发现两面针所含的香叶木甙有明显的抗炎作用,腹腔注射给药抗菌素大鼠角叉菜胶性足肿的ED50为100MGKG-1
据研究表明,两面针中含有多种生物碱,具有抗炎、镇痛作用。除此之外,白头翁还具有抗菌、抗肿瘤、抗病毒、增强免疫等多种药理作用。
北沙参中的欧前胡素和异欧前胡素具有较高生物学活性,是香豆素类的主要化合物。王宏虹等人发现两面针提取物的HPLC(高效液相色谱法)指针图谱与抗肝癌活性之间具有一定的谱效关系,认为两面针提取物具有一定的抗肝癌活性。其干燥根被称为前胡,主要成分为白花前胡甲素,是一种名贵中药,在《本草纲目》记载中有清肺热,化痰热,散风邪等功能。刘太华等经过研究发现乌头碱和新乌头碱均能抑制巨噬细胞RAW264.7分泌TNF-6,对于CD91和CD13的表达有明显的抑制作用,从而达到抗炎的目的,对于银屑病的治疗具有一定价值。
因此富含白藜芦醇的中草药如虎杖,可能有一定的免疫作用。药理实验结果显示,欧前胡素和异欧前胡素都具有抗炎、抗肿瘤、舒张血管等生理活性。
传统抗风湿中药威灵仙中提取的有效成份是威灵仙总皂苷。2.3.4佛手:佛手(拉丁学名:CitrusmedicaL.vAR.SARCODACTyLISSwINGLE)通常指芸香科植物佛手的干燥果实,是一种珍贵的中药材。
孙剑等通过研究羌活地黄汤对胶原性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞膜凋亡的影响,发现羌活地黄汤干预后,实验组的IL-17表达较模型组的低,滑膜细胞的增殖也降低,表明其可减少TH17细胞炎症因子分泌,减缓炎性反应。白藜芦醇正是对IL-1、TNF-起到抑制作用,从而能够成功控制促炎物质的数量,使其成功表达抗炎效果。
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